2013年4月3日 星期三

關於脊椎動物解剖實驗:到底有沒有什麼容易買到的安全藥物可以把青蛙安樂死?


幾篇下來,我想或許有人已經累了。如果想要做青蛙解剖實驗,但是行之有年的乙醚法不能也不該用,另一個流傳的酒精麻醉掩耳盜鈴法也不該用,那到底該用什麼方法把青蛙安樂死?

我會說,可以用腦脊髓穿刺。要是怕學生操作不順,那就比照這篇的方法,仔細講解之後,讓他們用已經穿刺犧牲的蛙練習,熟練以後再去拿自己的實驗蛙來穿刺。如果學生都不敢也不想自己動手,那麼授課者當然就辛苦一點,得要自己把所有的實驗蛙都穿刺搞定。

如果老師覺得這樣太累了,或者是其實對穿刺這個技術也不是很熟練沒什麼把握的話,那其實可以退一步,去收攤前的市場、或是直接殺去青蛙養殖場問問有沒有已經死掉的蛙可以買。這樣一來就不需要腦脊髓穿刺安樂死,只不過要辛苦一點,一隻兩隻慢慢收集冷凍起來直到足夠數量就是,畢竟通常不會有那麼大量的死亡青蛙讓你可以一次集滿所需數量。再退一步,也可以不要真的解剖青蛙。網路上現在有好多的照片跟影片可以拿來用,就算不親手犧牲一隻,也是可以看到滿山滿谷的照片影片來辨認外部型態和內部構造,還可以拿別人的流程來討論實驗態度和操作技巧正確與否,輕鬆又簡單。網路上也已經有不少的青蛙解剖虛擬操作網站可以拿來教學示範使用(這個報告裡面有整理,三十頁開始)。如果經費充裕,還可以去買各種逼真的生物教學模型,現在這一類的教學或收藏用的模型已經很容易找,價錢也不貴。拿來上課當成操作也很適合。 

或者再退一步,畢竟解剖青蛙已經變成選修單元示範實驗(4/7更正),也可以不要解剖青蛙,改用其他更容易操作、更沒有實驗動物福利疑慮和實驗室安全的動物來做(例如阿簡老師的蛤蜊)。甚至退到最後一步,其實不要有解剖課程也不見得多糟糕(芬蘭的生物系學生想必在大學之前從來都沒有犧牲動物的解剖課,看起來並沒有比較糟糕,反而對真正有機會可以動手的時候更加珍惜也更有興趣)。很多時候我對解剖過程中佔多數比重的『認識器官』的學習目的和效果感到懷疑。我們從小到大要『認識』『記得』的東西還怕不夠多嗎?多認識了這些器官,知道他們活生生的觸感、模樣、和氣味,又怎麼樣?這跟臉書加好友但是老死沒往來好像也沒太大差別。而很不幸的是,有好多的時候,我們就是在這種『覺得學到東西但其實只是片段瑣碎的資訊堆砌』的感覺中滿足了,然後就沒有更深一層的學習和思辨了,其實反而是不好的啊。

好啦,但是這個部落格的初衷,終究是期望可以提出一些解決辦法來解決問題。如果一定要解剖牛蛙,又真的沒辦法搞定腦脊髓穿刺的話,其實還是有辦法的。
 

你可以用丁香油(Clove oil, Eugenol)的水溶液來把牛蛙安樂死,或者是用丁香油的水溶液先麻醉牛蛙然後穿刺。

丁香油目前不在我國的實驗動物麻醉和安樂死的規範列表裡。但是國外近年來已經滿常使用在魚類麻醉和安樂死上,也開始用在一部份的兩棲類麻醉和安樂死上。使用上我覺得沒什麼問題,我在芬蘭也用過丁香油來麻醉魚類,但是用在兩棲類上,就請各位自己讀完後判斷了。以麻醉來看,Mitchell在2008出版的這本書裡面已經提到了丁香油水溶液可以用在美洲豹蛙Rana leopardo的麻醉(333mg/L)上,另外這一篇PAPER也證明了丁香油水溶液(0.35mL/L)浸泡十五分鐘,就足以讓大隻(100g上下)的爪蟾三十分鐘內都沒有基本反射,十五分鐘內對酸刺激無反應,而小一點的爪蟾當然就麻得更透了,加拿大的Laurentian University也已經有了相關的規範可以參考利用。所以,如果用這樣濃度的丁香油來麻醉實驗蛙,就算牛蛙的體型更大,也不過就泡更久一點,一定可以達到良好的麻醉效果,讓穿刺可以更容易進行。而如果是想要用丁香油直接把實驗蛙安樂死,這一個網頁就有列出丁香油做為兩棲類安樂死的方法之一(而且底下有包含獸醫指導手冊的參考文獻),但是很不幸的沒有寫濃度和浸泡時間。因此我的猜想是,如果真的要拿丁香油來把實驗蛙安樂死的話,那就用Laurentian U建議的最高濃度(450mg/L)去泡個半小時或更長時間吧。但是!這只是我的猜測,無論如何都還得要經過仔細的實驗跟觀察才能確定這樣的濃度要泡多長時間才合用!!!!!

至於丁香油會不會很難買?請自己去化工行或藥品店之類的地方問吧。我想比起其他的規範內麻醉用藥品或乙醚應該好買很多才是


4/8更新:
從高中生物老師友人得知,康熹版的生物課本裡面用的方法是『二苯氧基乙醇』,而且還附上影片,或許是想展示這個犧牲法對動物的刺激少很多。我要給康熹出版社跟編課本的作者老師拍拍手,終於選了一個對動物比較友善,比較注重動物福利的方法了。(不要再用該死的乙醚了!!)

簡單查了一下,二苯氧基乙醇的確是常用的魚類麻醉劑,尤其在法國的養殖業。兩棲類的麻醉用的不多,但也不是沒有但是目前為止似乎只建議用在魚類安樂死上,兩棲類並不建議使用這一點丁香油勝)。至於價錢方面,跟丁香油一樣都很便宜,也不是管制藥品所以容易買到,不過如果想知道哪個最便宜,就請各位自己去比價了。另外要注意的一點是,二苯氧基乙醇的刺激性稍微大一點,在密閉空間中使用的時候可能會讓操作者的眼睛和皮膚有點不適這一點還是丁香油勝)。